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宝粉请留步●!
跟您聊聊酵母转化的那些事儿
 
做过酵母杂交实验的宝粉应该都有体会,酵母转化实验是酵母杂交实验过程中一大难点,今天就来和大家唠扯唠扯酵母转化的那些事儿。
在酵母杂交实验中,往往培养酵母时很顺利,却在酵母转化或者筛选的实验中意外败下阵来。
Takara有两款酵母转化试剂盒可以帮助大家完成实验,值得关注的是,即便您不从事酵母杂交相关实验,但只要涉及到酵母表达,它们都可以帮您解决酵母转化方面的难题。
 
酵母转化试剂盒:630439 Yeastmaker Yeast Ttransformation System 2
采用聚乙二醇(PEG)/醋酸锂方法高效制备并转化酵母感受态菌株,适合用于小规模或者文库规模的高效酵母转化方法,转化效率一般为3×105转化子/μg质粒DNA。
 
制品特点:

■ 第一大优势
试剂盒提供了YPD Plus复苏培养基,这种培养基采用特别的配方,有助于转化后的酵母细胞从热击中复苏。

 

■ 第二大优势
优化后的鲑鱼精子DNA用于酵母转化,保护目的质粒不被真核细胞降解,可单独购买630440 Yeastmaker Carrier DNA

 

■ 第三大优势
适用于文库级别的酵母菌转化,可以放心构建酵母杂交文库。除了转化酵母文库外,还可用于酵母表达实验,专业解决酵母转化难题。

 
酵母转化实验的注意事项:
1. 建议做对照实验;
2. 质粒DNA的质量一定要高,可以用乙醇再次纯化;
3. DMSO、Carrier DNA质量要高,最好试剂是新鲜的,Carrier DNA在转化之前最好用沸水变性;
4. SD培养基pH值应调为5.8,YPDA应调为6.5。如果转化不成功,重新配制培养基,检测对照组的转化效率;
5. 如果BD载体翻译出来的融合蛋白质对酵母菌有毒性,此时可以使用低表达BD载体pGBT9。
 
如果您嫌弃制备酵母感受态麻烦,还可以使用我们的小规?焖僮湍甘约梁●!
 
简便&快速酵母转化试剂:631851 Quick & Easy Yeast Transformation Mix
正所谓“尺有所短,寸有所长”,这款转化试剂盒虽然不能进行文库级别的酵母转化,但是,您使用它无需制备感受态细胞。它可以用于酿酒酵母或毕赤酵母的小规模转化,酿酒酵母菌小规模转化仅需1.5 hr,毕赤酵母转化操作不超过30 min,操作简便、节省时间。
 
制品特点
· 酿酒酵母的转化只需1.5 hr,毕赤酵母的转化只需30 min
· 无需制备酵母感受态细胞
· 可以转化在平板上培养1个月左右的酿酒酵母细胞
 
与一般酵母转化试剂的流程对比,小规?焖
 
■ 点击图片查看相关资料
快速&简便酵母转化试剂宣传页
 
不论您正在做酵母杂交实验还是酵母表达实验,采用以上工具都可以有效解决酵母转化方面的难题,宝粉请留步,可不兴错过了啊●!
 
酵母转化实验操作视频:
酵母双杂交实验操作(视频21分开始)